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一株高效生产依克多因的基因工程菌及其制备和应用【异议或纠错】

档案编号: CQ-111-1474-9149
档案文号:
专利权人: 申请人 
发布时间: 发布时间 
档案分类: 专利权 
分 类 号: 第C12N1/21;C12N15/70;C12N15/31;C12N15/53;C12N15/54;C12N15/60;C12P17/12;C12R1/19类
授权状态: 已授权
档案内容: 本发明提出了一株高效生产依克多因的基因工程菌及其制备和应用,其特征在于,所述基因工程菌以大肠杆菌MG1655,编号为ATCC 47076为宿主,其包含如下改造:基于丙酮酸响应转录因子PdhR,在T7启动子的下游通过融合PCR的方法插入PdhR结合位点PdhR Box,使其转录受到丙酮酸响应转录因子PdhR抑制,利用试剂盒ClonExpress通过无缝克隆的方法构建得到受丙酮酸调控的Ppr启动子;外源引入T7RNAP,在PxylF下表达;外源引入密码子优化的ectABC基因簇,一个拷贝在T7启动子下,另一个拷贝在构建的受丙酮酸调控的强启动子Ppr启动子下;在Ppr控制下增量表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因ppc和天冬氨酸激酶基因lysC;通过反义转录抑制thrA、lysA、iclR和zwf基因的表达。本申请工程菌能够生产依克多因,并具有较高的产量。
附件下载:  (原始资料备查)

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